細(xì)胞系的維持是培養(yǎng)工作重要內(nèi)容。通過換液、傳代、再換液、再傳代和細(xì)胞凍存實(shí)現(xiàn)細(xì)胞系的維持,但對每一個細(xì)胞系來說都有其自身特點(diǎn)。
①細(xì)胞系檔案要記錄好,如組織來源,生物學(xué)特性,培養(yǎng)液要求、傳代、換液時間和規(guī)律,細(xì)胞的遺傳學(xué)標(biāo)志,生長形態(tài),常規(guī)病理染色的標(biāo)本等。這些記錄對于保證細(xì)胞正常生長,保持細(xì)胞的一致、觀察長期體外培養(yǎng)后細(xì)胞特性的改變都有十分重要的意義。因此,無論在索取新細(xì)胞系還是自己建立新細(xì)胞系時都要盡可能把上述資料收集齊全。
②細(xì)胞系的傳代、換液一般都有自身的規(guī)律性,因此在維持傳代時要注意保持其穩(wěn)定的規(guī)律性,這樣可以減少由于傳代時細(xì)胞密度的頻繁增減或換液時間的不規(guī)律而導(dǎo)致細(xì)胞生長特性發(fā)生改變,影響以后細(xì)胞實(shí)驗。
③多種細(xì)胞系維持傳代,要嚴(yán)格操作程序,以防細(xì)胞之間的交叉污染。傳代時所用器械要編號或做好標(biāo)記,嚴(yán)禁交叉使用。
④每一種細(xì)胞系都應(yīng)有充足的凍存儲備,防止由于培養(yǎng)細(xì)胞污染等因素造成細(xì)胞系的絕種;另外,二倍體細(xì)胞等有限細(xì)胞系如果暫時不用,凍存,以免傳代太多,造成細(xì)胞衰老或發(fā)生改變。